《药理学》实验课程教学大纲
一、课程基本信息
课程代码:C0413006s
课程名称:机能学实验2
课程性质:专业必修课
适用专业和年级:四年制公共事业管理 二年级
开课学期:秋季学期
课程总学时:48学时(理论:32 学时;实验:16学时)
课程简介:《药理学实验》是我校医学生的必修基础课,药理学是一门实验性课程,它的理论源自于实验,学生通过理论课和实验课的学习,加深掌握药理学的基本知识和规律,并通过实验学习,培养学生的科学的思维、严谨的学风和解决实际问题的能力。
推荐教材:《机能学实验药理学部分》自编教材
参考书目:ISBN 7-117-07766-2.董志主编.《药理学》,第2版.北京;人民卫生出版社,2006
ISBN 9787117129084.杨世杰主编.《药理学》.第2版.北京;人民卫生出版社,2010年
二、课程总目标:
药理实验总目标:掌握药理实验的基本操作及仪器使用、各种实验动物的使用与给药方法,熟悉药理学实验设计知识和方法,通过综合与探索性实验,初步培养学生的科研能力,以及为学生的临床实践能力打下基础。
三、大纲内容
实验一:药理学实验的基本知识和基本技能
【实验目的和要求】
1.掌握药理学实验的基本方法,掌握小鼠的捉拿、给药、取血、处死。
2.了解获得药理学知识的科学途径。
【实验原理】
【主要实验仪器与器材】
小鼠灌胃针、眼科电子天平、眼科直剪、弯剪、眼科直镊、弯镊等
【实验步骤】
1.小鼠的捉拿。
2.实验动物标号。
3.给药方法:灌胃法、腹腔注射法、尾静脉注射法。
4.取血: 眼球取血、断尾取血。
5.取脏器: 肺脏、脾、肾、脑及计算肺系数、脑系数。
【注意事项】
实验操作的规范性,防止被动物咬伤。
【预期结果】
熟练掌握小鼠标记、给药、取血、取脏器的方法。
【作业】
作业内容:
1.小鼠各种给药、取血的方法要点。
2. 计算小鼠的肺系数、脑系数。
形 式:
书面形式上交
实验二:不同给药途径和不同给药剂量对药物作用的影响
【实验目的和要求】
1.掌握药物剂量与药物作用的关系,不同给药途径与药理作用的关系。
2.熟悉戊巴比妥钠的药理作用。
【实验原理】
1.不同浓度的戊巴比妥钠对中枢的作用不同。
2.硫酸镁不同给药途径产生不同的作用。
【主要实验仪器与器材】
鼠笼、注射器、电子天平、小鼠灌胃针
【实验步骤】
1.取小鼠3只,分别称重,标记,观察其一般活动状态观察,和痛觉反应。
2.然后分别腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠溶液:1号鼠5mg/kg (即0.05%的戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g);2号鼠40mg/kg (即0.4%的戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g);3号鼠100mg /kg (即1%的戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g);观察并记录小鼠翻正反射消失及恢复的时间。
3.取小鼠2只,称重,标记,观察小鼠的一般活动情况。
4.4号鼠肌肉注射10%硫酸镁溶液0.1ml/10g;5号鼠灌胃给10% 硫酸镁溶液0.1ml/10g。给药后如见肌肉松弛呼吸抑制时,立即腹腔注射氯化钙5%氯化钙溶液0.08/10g,观察比较两种给药方式的药物反应。
【注意事项】
1.小鼠的一般活动状况可通过观察翻正反射:提起小鼠尾巴,将小鼠腹部朝上放于台面上,小鼠立即翻正过来,
说明翻正反射存在。如翻正反射减弱或消失说明小鼠的活动状况差。
2.观察小鼠的痛觉反应:以手掐鼠尾,如痛觉反应存在可有挣扎或竖尾反应。
【预期结果】
1.从低到高3个不同浓度的戊巴比妥钠注射给药后小鼠依次出现镇静、催眠、麻醉的现象。
2.4号鼠出现四肢松弛甚至呼吸抑制,5号鼠出现肌肉松弛。
【作业】
作业内容:
1.将实验结果汇总,书写实验报告。
2.不同的给药剂量和不同的给药途径对药物作用的影响。
形 式:
书面形式上交
实验三:有机磷酸酯类药物的中毒及其解救
【实验目的和要求】
1.掌握有机磷酸酯类药物中毒的症状。
2.掌握阿托品和解磷定对有机磷酸酯类药物中毒的解毒原理。
【实验原理】
有机磷酸酯类中毒后,胆碱酯酶(chE)活性受到抑制,失去水解乙酰胆碱(Ach)的能力,Ach在体内蓄积,引起
一系列中毒症状(M样、N样和中枢神经系统症状)。抗胆碱药阿托品能拮抗Ach的作用,解除有机磷酸酯类中
毒M样症状。胆碱酯酶复活药解磷定能使被有机磷酸酯类抑制的胆碱酯酶活性恢复,对M及N样症状有效。两
药合用可提高解救效果。
【主要实验仪器与器材】
注射器、游标卡尺、胃管等。
【实验步骤】
1.家兔,称重,观察下列指标:呼吸(频率、幅度、节律是否均匀),瞳孔大小(用游标卡尺测量)、唾液分泌、
肌张力及有无震颤、活动情况等,分别记录之。
2.将家兔固定在兔盒中,找到耳缘静脉,插入与注射器相连的头皮静脉注射针头。按120mg/kg( 5%溶液
2.4ml/kg)剂量静脉注射敌百虫溶液,观察各项指标,并记录之。中毒症状明显时(当开始出现抽搐、唾液分
泌增多、肌肉振颤、运动障碍现象),甲兔立即静脉注射atropine 2mg/kg(0.2%溶液1.0 ml/kg),乙兔立即
静脉注射PAM50mg/kg(2.5%溶液2.0 ml/kg),观察并记录甲乙两兔的中毒症状有何变化,特别注意甲兔和乙
兔的区别。每隔5分钟,检查各项生理指标一次。
3.实验结束时,补注阿托品或解磷定。
【注意事项】
1.注射时,先用头皮针与装有生理盐水的注射器相连,找到静脉,穿刺成功后用胶布固定好,再换上装有敌百
虫溶液的注射器给药。保持此静脉通道,不给药时应连续、缓慢地推注生理盐水,以免形成血栓。
2.给药后如15分钟尚未出现中毒症状,可再追加1/3量。
3.注意解磷定和阿托品的给药剂量,注射过量亦可致死。
4.观察肌张力的方法:将家兔置台面上,拉后肢,如立即回缩说明肌张力正常;如拉后不回缩或回缩迟缓,说
明肌张力消失或降低。
【预期结果】
1.阿托品为M胆碱受体阻断药,能竞争性地与M胆碱受体结合,从而阻断Ach所致的M样
2.解磷定可恢复胆碱酯酶的活性,控制肌束抽搐和震颤的效果较阿托品明显。
【作业】
作业内容:
1.将实验结果汇总,书写实验报告。
2.根据实验结果,分析有机磷农药的中毒机制及阿托品和解磷定的解毒原理。
形 式:
书面形式上交
实验四:烟的急性毒性实验
【实验目的和要求】
掌握烟碱的毒性了解抽烟的害处。
【实验原理】
烟碱的中枢神经毒性作用。
【主要实验仪器与器材】
水烟斗1支,10ml试管1支,试管夹和支架,酒精灯,漏斗,滤纸,试管架,1ml注射器2支,5号针头2个。
【实验步骤】
1.实验前每组选出吸纸烟的同学一人,吸烟前先量取蒸馏水2ml置入水烟斗内,然后将纸烟插入烟斗上,点燃
纸烟缓慢吸入,吸入的气体流经蒸馏水时,烟内的毒物如烟碱等即溶解于水中。
2.实验时取小白鼠3只,观察其正常活动后,一鼠腹腔注射吸烟后水烟斗内的液体0.5ml,另一只鼠腹腔注射生
理盐水0.5ml作对照,注射后继续观察,并记录中毒症状及发展情况。另取纸烟1支,加入5ml蒸馏水煮沸,
放冷,过滤后,取半量注射进小鼠腹腔中,并和前面两鼠比较。
【注意事项】
1.小白鼠体重为25~30g者,注射烟斗水0.8ml为宜,30g以上者注射1.0ml。
2.纸烟点燃后请缓缓吸入,以利于烟内的毒性成份充分地溶解于水中。
【预期结果】
大剂量的烟碱可使小鼠中毒致死。
【作业】
作业内容:
抽烟有何毒性,应如何预防?
形 式:
书面形式上交
实验五:药物的镇痛作用
【实验目的和要求】
1.掌握扭体法镇痛实验方法、热板法镇痛实验方法。
2.掌握哌替啶镇痛作用。
【实验原理】
某些化学物质(酒石酸锑钾溶液,醋酸溶液等),注入小鼠腹腔可刺激腹膜引起持久的疼痛,致使小鼠产生“扭
体”反应。镇痛药减轻疼痛反应,可明显地减少发生“扭体”反应的小鼠数。
【主要实验仪器与器材】恒温电热板、鼠笼、天平、、烧杯、秒表。
【实验步骤】
第一部分
1.取健康小白鼠2只,称重,随机分成2组,每组1只,观察各鼠活动情况后。
2.分别腹腔注射0.2 %哌替啶溶液及生理盐水,给药体积均为0.1ml/10g。
3.给药30min后,各鼠分别腹腔注射0.6 % 醋酸0.1ml/只,给药后5分钟,观察10min内动物产生“扭体”反应的次数。
第二部分
1.准备工作 开启超级恒温器,调节超级恒温器温度恒定于55±0.1℃ 。
2.小鼠的选择及正常痛阈的测定 取筛选合格的小鼠2只,随机分为2组,各鼠编号后重复测其正常痛阈值一次,
将所测两次正常痛阈平均值作为该鼠给药前痛阈值。
3.给药及给药后痛阈值测定 按0.1ml/10g腹腔注射给药,第1组给予0.2%哌替啶溶液,第2组给予生理盐水
作为对照。给药后10min、30min后各测小鼠痛阈值1次。若放入烧杯内60秒仍无反应,应将小鼠取出,痛阈值
以60秒计。
4.实验完毕后,按下列公式计算不同时间的痛阈提高百分率:
给药后平均痛阈值 – 给药前平均痛阈值(%)
痛阈提高百分率(%)= ——————————————————————
给药前平均痛阈值
【注意事项】
1.小鼠以雌性为好,因雄性小鼠受热后阴囊松弛触及热板,易致过敏反应。
2.室温对本实验有一定影响,以15 ~20ºC为宜,过低小鼠反应迟钝,过高则小鼠过于敏感易引起跳跃,影响结果
准确性。
3.正常小鼠放入热板后易出现不安、举前肢、舔前足、踢后肢等现象,这些动作不能作为疼痛指标,只有舔后足才作为疼痛指标。
【预期结果】
哌替啶可减少扭体反应的次数;哌替啶可提高小鼠痛阈。
【作业】
作业内容:
汇总全实验室的实验结果,计算镇痛百分率和痛阈提高百分率,书写实验报告。
形 式:
书面形式上交。
四、主要实验教材(指导书)及参考用书
机能学实验指导(药理学部分) 自编
ISBN:703026497.胡还忠. 医学机能学实验教程. 3版.北京 科学出版社.2010
五、课程考核方式
课程考核方式:考试
六、成绩评定:
课程考核分两部分:一部分是实验操作的考试,占期末成绩的70%。一部分是实验报告,占期
末成绩的30%;
实验项目汇总表:
序号 |
实验编号 |
实验名称 |
时数 |
实验类别 |
实验类型 |
实验要求 |
每组人数 |
实验一 |
C041300601* |
动物实验基本操作 |
3 |
基础 |
综合性 |
必修 |
4-5 |
实验二 |
C041300602* |
不同给药途径和不同给药剂量对药物作用的影响 |
4 |
基础 |
验证性 |
必修 |
4-5 |
实验三 |
C041300603* |
家兔有机磷酸酯类药物的中毒及其解救 |
4 |
基础 |
综合性 |
必修 |
4-5 |
实验四 |
C041300604* |
烟的急性毒性实验 |
2 |
基础 |
综合性 |
必修 |
4-5 |
实验五 |
C041300605* |
药物的镇痛作用 |
3 |
基础 |
设计研究 |
必修 |
4-5 |
执笔人:张晓英、侯淸利
审定人:孙芳云